有人做過試驗，切除大白鼠的雙側睪丸，它的交配能力明顯下降，並短時間內消失。如將睪丸酮注入無睪丸的鼠體內，其交配能力又重新恢復正常。這也說明睪丸酮對低級動物的影響更明顯。而對高級的動物，包括人在內，如果在早期即有睪丸酮的缺乏，就會影響第二性征的發育，性慾低下，甚至性慾喪失。但如果男性成熟之後出現雄性激素的缺乏，其結果可能是性慾低下，性功能障礙。
睪丸酮由間質細胞分泌到小管間組織中，沿三條路線由睪丸釋放：精索靜脈血流、淋巴、睪丸網液。其中睪丸酮的濃度以精索靜脈血流中最高，淋巴次之，睪丸網中的濃度最低。大量資料證明，曲細精管局部睪丸酮的濃度對維持正常精子的發生極為重要。大劑量的外源性睪丸酮可抑制睪丸的生精機能，這是抑制了垂體促黃體生成素的分泌，從而減少了內源性的睪丸酮的分泌。這也說明，男性（雄性）激素的分泌受腦垂體和丘腦下部的調節，在性激素的分泌過程中有相互制約的作用，這一調節過程也是非常復雜的。通常人們又把丘腦垂體性腺的這一制約系統稱負反饋作用，維持人體內的各種調節來達到相對的平衡狀態及正常的生理機能。而睪丸酮在血中的濃度有晝夜變化，早晨水平高，晚間水平低。
患者存在不同程度的性激素水平降低，尤其是內分泌陽痿患者，對這類患者，適當補充男性雄性激素，可能對陽痿有一定的治療作用。目前臨床較常用的藥物是丙酸睪丸酮。近年來，中藥臨床和動物實驗均證實了，某些補腎中藥具有提高血漿睪丸酮水平，增加雄性大白鼠睪丸重量的作用，提示某些中藥有類似促性腺激素作用。
